走近大鼠雌二醇ELISA檢測試劑盒試驗原理

        E2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知E2濃度的標準品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將E2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中E2的濃度呈比例關(guān)系。

走近大鼠雌二醇ELISA檢測試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶標板

1塊板（96T）

半塊板（48T）

塑料膜板蓋

1塊

半塊

標準品：500pg/ml

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

空白對照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

標準品稀釋緩沖液

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

生物素標記的抗E2抗體

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

親和鏈酶素-HRP

1瓶（12ml）

1瓶（5ml）

洗滌緩沖液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

終止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml

自備材料：

1.  蒸餾水。

2.  加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

樣品收集、處理及保存方法：

 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

2、  血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、  細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、  組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

 5、  保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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